Biotecnologia de Aptâmeros no diagnóstico de vírus oncogênicos: uma breve revisão da literatura e análises preliminares em Herpes Vírus Humano Tipo 8

Abstract

Vírus oncogênicos são vírus capazes de infectar e se integrar às células e induzir a oncogênese, sendo responsáveis por aproximadamente 30% dos casos de todos os tipos de câncer em países de baixa e média renda. O câncer é uma das principais causas de óbitos no mundo sendo estimado cerca de 10 milhões de óbitos apenas no ano de 2020, sendo o diagnóstico precoce essencial para o tratamento e diminuição de taxa de mortalidade. Aptâmeros são oligonucleotídeos de fita simples capazes de se dobrar em formas tridimensionais e se complexar a uma grande diversidade de alvos, apresentando vantagens frente a métodos já utilizados em diagnóstico e tratamento de doenças. O presente estudo visa realizar uma revisão bibliográfica acerca da utilização da biotecnologia de aptâmeros no diagnóstico de vírus oncogênicos e analisar a replicação viral de HHV-8 através do cultivo in vitro de linfócitos B. Sobre a revisão bibliográfica, foi buscado nas bases de dados CAPS, Pubmed, Scielo e Science Direct estudos utilizando aptâmeros no diagnóstico de oncovírus conduzidos nos últimos 10 anos. A partir do levantamento realizado, foram identificados 76 artigos relevantes e após análise criteriosa dos textos, foram incluídos 13 artigos, sendo 5 sobre o vírus da hepatite B, 5 relacionados ao vírus da hepatite C e 3 abordando o vírus do papiloma humano. Os estudos selecionados apresentaram resultados promissores e mais vantajosos em comparação aos métodos de diagnóstico já utilizados na prática clínica. Em relação aos experimentos conduzidos em laboratório, foi realizada a avaliação da replicação viral de HHV-8 através do cultivo in vitro de linfócitos B (BCBL-1) que apresenta o genoma viral do HHV-8 inserido de forma latente. Para isso, a replicação viral foi estimulada pelo tratamento com o fármaco Forbol 12-Miristato 13- Acetato (PMA) em diferentes concentrações e as amostras foram coletadas em diferentes tempos pós-infecção, a fim de determinar qual apresenta maior carga viral. O DNA viral foi quantificado no equipamento QuantStudio™ RealTime PCR System, pela Rede de Plataformas Tecnológicas da Fiocruz. Como resultado, observou-se que a concentração de 30 ng/mL do PMA em 96 horas coletando o sobrenadante celular se apresenta como a melhor opção para seguir com os experimentos de seleção de aptâmeros. Diante desses resultados, é possível observar que a biotecnologia de aptâmeros é uma alternativa viável para o diagnóstico de doenças, destacando nesse trabalho, cânceres causados por vírus. Com isso, espera-se que se apresente como uma candidata em potencial para ser utilizada como alternativa de método de identificação e diferenciação de células infectadas por HHV-8 e, consequentemente, auxiliar no diagnóstico de doenças associadas ao vírus.