Avaliação do potencial citotóxico de um grupo de quinazolinonas produzidas no IFRJ em células vero in vitro

Abstract

O cultivo de células é uma prática existente há muitas décadas e seu desenvolvimento técnico foi fundamental para pesquisa com células-tronco, órgãos em 3D, áreas biomédicas, produção de fármacos, dentre muitas outras. Para o desenvolvimento de um novo fármaco são necessários processos de estudos, o qual inclui os testes de citotoxicidade in vitro com células, testes pré-clínicos e com humanos na fase clínica. Estudos realizados pelo nosso grupo de pesquisa,objetiva avaliar o efeito de quinazolinonas sintéticas produzidas no Instituto Federal do Rio de Janeiro na eficácia do tratamento de doenças hipertensivas. Para tal, foi evidenciada que alguns de seus membros apresentam potente efeito, com IC50 na faixa de 1 μM sobre vasos arteriais isoladas de ratos in vitro. Nesse contexto, nosso trabalho foi o de avaliar o potencial citotóxico das quinazolinonasque apresentaram efeito relaxante em artérias. Neste caso, as substâncias testes foram identificadas como QUIN-2, QUIN-4 e QUIN-8 para manutenção do sigilo visando futuras patentes. Células epiteliais estabelecidas do rim de macaco verde africano Cercopithecus aethiops (linhagem VERO) são mantidas em meio de cultura DMEM com 10% SFB e expostas a diferentes concentrações (0,3 μM, 1 μM, 3 μM, 10 μM, 30 μM) das substâncias teste para avaliar a toxicidade com o auxílio do método de MTT. Após os ensaios iniciais para ajuste do protocolo de MTT para placas de 24 poços, ficou estabelecido a concentração celular da linhagem VERO para teste em 20x104 células / poço.De acordo com os gráficos de porcentagem de viabilidade celular x concentração das quinazolinonas teste (QUIN-2, QUIN-4 e QUIN-8) que indicaram não haver, nessa faixa de concentração, efeitos citotóxicos significativos comparados ao grupo controle. Na avaliação morfológica ao microscópio não foram observadas alterações celulares.De acordo com os resultados de viabilidade celular não foram observados efeitos citotóxicos significativos. Estes testes são iniciais e carecem de outros para uma avaliação completa da existência ou não de outras formas de toxicidade celular, como a genotoxicidade, mas já auxiliam na decisão de passarmos à etapa de ensaios com modelosanimais com mais segurança. Assim os objetivos de contribuir com o desenvolvimento do projeto de identificação de novas substâncias com potencial anti-hipertensivo foram atingidos dentro da proposta desse trabalho.